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用于补料分批的N-1 灌流

N-1灌流是指在生产生物反应器(N)之前的种子扩增步骤中,使用细胞截留设备,达到高细胞密度,从而获得更快、更稳健的工艺,同时维持基于补料分批的现有生产方案。

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N-1 灌流

N-1灌流是种子扩增强化的一种形式,其是指生产生物反应器(N)前一步中细胞生长的强化。该工艺强化通过在N-1生物反应器上连接一个细胞截留设备实现,如 XCell ATF® 设备,以获得高细胞密度和活性,从而以更高的起始细胞密度接种生产生物反应器,缩短了生产生物反应器的运行时间。这可显著提高工厂产量,而不需要直接改变核心生产工艺。获得用于接种生产生物反应器的高细胞密度接种液,需要一个稳健的细胞截留设备。

以 N-1开始强化 

易于实施和产量提升优势的结合使N-1灌流成为上游强化最常用的起点。采用后,可再进一步强化种子扩增、在N生物反应器增加HPH或过渡到连续工艺。 

提高吞吐量,节省时间 

N-1灌流可强化补料分批工艺,提高工厂吞吐量。以更高的起始密度接种,N生物反应器中的细胞可更快速地生长,相比传统补料分批,可达到更高的VCD,并获得更高的产量。与标准的补料分批工艺相比,可在更短的时间内收获,增加每年可运行的批次数量。或者,可维持N生物反应器的运行时间,以提高总产量。 

维持补料分批工艺   

N-1灌流强化可提高N生物反应器的产量和吞吐量,同时维持补料分批工艺。不需要进行N生物反应器的灌流或培养基置换,允许N生物反应器保持单个补料分批收获点。  

验证影响最小化   

以最低的工艺修改和监管文件编辑而实现强化。N生物反应器不需要连接附加设备,生产过程中没有培养基置换,且细胞活性更高,通常杂质值也相应地更低。  

N-1 性能数据

N 生物反应器达到 350 x 106 VCD 

结合N-1灌流的补料分批工艺在6天内达到350 x 106 cells/mL VCD。相比之下,标准补料分批在14天内达到30 x 106 cells/mL活细胞密度(VCD)(数据未显示)。使用N-1灌流后,N生物反应器的产量提高了20倍(数据未显示),且活性维持在90%以上。 

更高的细胞密度和活性  

  • 相比补料分批,VCD提高10倍  
  • VCD 高达 350 x 106 cells/mL
  • 生产时间降低50% 
  • 产量提高20倍 
  • 更低的产品成本 

N-1灌流使VCD提高10倍,疫苗生产时间降低50% 

使用灌流的N-1生物反应器中的细胞密度可在4-5天内从8 x 106 cells/mL迅速增加到80 x 106 cells/mL (VCD提高10倍)。相比补料分批,以N-1灌流的培养液接种N生物反应器,可使起始活细胞密度提高10倍(A)。3天后,N-1灌流接种的生物反应器达到35 x 106 cells/mL VCD。相比之下,对照组达到25x 106 cells/mL VCD需要6天。利用更高的VCD,可提高吞吐量或产量。在第8天收获N-1灌流接种的补料分批生物反应器的产量相当于在第14天收获的传统接种补料分批对照组,节省了6天的N生物反应器运行时间(C)。或者,在同样的第14天收获N-1补料分批工艺,总产量提高25%。 

  • N-1 生物反应器在 4-5 天达到 10倍 VCD
  • 结合N-1灌流的补料分批生物反应器达到35 x 106 cells/mL的最高VCD,而传统补料分批为25 x 106 cells/mL
  • 提前3天达到最高VCD
  • 提前6天收获相同的产量,或者
  • 运行14天,产量提高25%
N- 1生物反应器VCD
生产生物反应器VCD
生产生物反应器

n-1 灌流技术

交替式切向流(ATF)过滤

ATF是一种屡获嘉奖的技术,其可去除耗竭的培养基,同时将细胞截留在培养体系中。应用时,将 XCell ATF® 设备连接到生物反应器,ATF 可最大限度地降低细胞剪切,并保持细胞与生物反应器内容物的恒定平衡,从而获得更快的细胞生长,达到更高的密度和产量。目前,XCell ATF® 设备,包括一次性使用或重复使用形式,已经成为单抗和重组蛋白生产的领先灌流设备。

Xcell ATF® 技术

Xcell ATF® 设备

XCell™ 控制器

高效细胞培养添加物

Repligen开发和生产的细胞培养添加物可提供血清添加物的优势,同时维持无动物源性工艺。

  • LONG®R3 IGF-I (LONG R3)相比胰岛素,在细胞培养中的效价可增加200倍,稳定性可增加2倍。
  • LONG® EGF 是天然EGF或重组人EGF(hEGF)的同等替代物。