您使用的浏览器不受支持。
本网站的某些功能可能无法正常运行。为获得最佳的用户体验,请使用Chrome、Firefox、Safari或Edge浏览本网站。

高产量收获

用于补料分批工艺的高产量收获可简化收获操作,强化生产,同时消除离心和深层过滤步骤,而收获料液可直接进行捕获层析柱处理。

查看更多信息

高产量收获 (HPH)

advantages-HPH.png Productivity Harvest uses an XCell ATF® Cell Retention Device after peak density is achieved in a typical Fed-Batch process. Fresh media is added in a set flow rate while the harvesting of the product is initiated. This results in significant productivity and process gains. 

HPH产生相同产物滴度的时间是传统补料分批的一半,或可在不增加额外时间的前提下,获得两倍的产物滴度。利用HPH和N-1灌流的组合,可在一半的时间内获得高达两倍的产物。选择此工艺可过渡到一个单步、封闭式系统,并消除需要高资本支出、非线性放大且不适合剪切敏感型应用的离心以及低通量、低处理量且需要费时费力的搭建操作的深层过滤。无论您的目标应用是单抗、重组蛋白、慢病毒、酶或疫苗,HPH都可以提高生产效率,更快地提供更多产品。  

提高产率
  • 蛋白质产量可增加达2倍,而不增加运行时间,或
  • 可在更短的天数收获相同的滴度,提高产率
优化工艺
  • 获得更健康的培养,同时降低工艺相关杂质
  • 降低单元操作和原材料数量
  • 向单步经0.2μm过滤的封闭系统转变
  • 收获料液可直接用于下游纯化
维持补料分批工艺

HPH提高产量和吞吐量,同时维持补料分批工艺。N生物反应器不需要进行灌流或培养基置换操作,而可允许N生物反应器维持单一补料分批收获点。  

高产量收获性能数据

HPH可使VCD提高5倍

HPH可在4 x 106 cells/mL补料分批工艺的基础上到达20 x 106 cells/mL VCD。HPH 中细胞活性在8 天内可保持约为100%。而在补料分批中,活性在第3天后开始下降,至第 8-9天时约为 75%。更高的VCD和活性可转化为更高的总产物产量。HPH工艺的产量约为 1500 mg/day。而补料分批在约 8-10 天内达到800-1000  mg/day  

使用HPH获得更高的活细胞密度(VCD)和活性  

  • 相比标准补料分批,使用HPH补料分批可使活细胞密度提高4倍 
  • 活性维持接近100%  

使用高产量收获获得更高的产物滴度  

  • 相比传统补料分批,产物提高2倍 
  • 在与补料分批相同(或更少)的天数内收获 

HPH使VCD提高3倍,mAb产量提高2倍  

传统补料分批可以在14天内达到约10 x106 cells/mL VCD,细胞活性从第8天开始下降至第14天的约80%。以 0.25、0.5和1 VVD进行HPH时,前10天达到与传统补料分批相似的活细胞密度,在第10天,开始HPH工艺,并达到40 x 106 cells/mL VCD,而传统补料分批工艺为10 x 106 cells/mL VCD。在整个HPH运行过程中,活性保持在90%以上。HPH中,更高的VCD和更健康的培养可实现200%的IgG产量提升。相比传统补料分批中150 μg(每mg IgG)的宿主细胞蛋白(HCP)含量, HPH工艺中宿主细胞蛋白(HCP)含量可显著降低至80 - 100 ug (每 mg  IgG)。杂质水平更低的 0.2 µm过滤澄清料液可去除离心和深层过滤单元操作,进一步提高效率。 

更高的活细胞密度和更高的产物产量 

  • 相比传统补料分批,使用HPH,总累积IgG可提高2倍 
  • 与补料分批不同,收获的产物经过了0.2 µm过滤  
  • 活细胞密度可提高3倍,且在整个运行中细胞活性维持>90% 

澄清的收获液可直接层析纯化 

  • 相比传统补料分批收获液,HPH收获液中每mg IgG的宿主细胞蛋白(HCP)含量可降低30-50% 
  • 0.2 µm澄清的产物以及显著更低的杂质水平可消除离心和深层过滤步骤 

高产量收获(HPH)是由Repligen开发的一种新应用,它使您能够以完全无菌的方式收获补料分批生物反应器,同时消除离心和深层过滤。通过使用XCell ATF®系统,获得经0.2µm过滤、封闭系统和单步工艺,HPH可以获得显著高于行业标准的产量,并获得可直接进行批量或连续层析处理的无菌、澄清批次收获液。本网络研讨会将介绍HPH的工作原理,展示蛋白质产量提高两倍的初步测试结果,以及如何根据您的产品需求或工厂设计,应用HPH。

工作原理

以下为HPH工艺操作的典型示例,其包括三个主要步骤:开始补料分批工艺,连接细胞截留装置开始高产量收获,之后开始抽液降低生物反应器内体积。HPH的启动时间是灵活的,且取决于工艺。收获可以在与传统补料分批相同的时间框架内完成,或者,生物反应器运行可以根据工艺和设施条件适当延长,以进一步提高产量。 

步骤A:工艺开始 
正常开始补料分批工艺。 

步骤B:连接细胞截留设备(CRD),开始高产量收获 
当达到峰细胞密度后,连接细胞截留装置(CRD),并开始以较低的流速泵入新鲜的培养基。随着新鲜培养基的泵入,开始慢慢收获产物。  

步骤C:抽液 
运行的最后一天,停止添加新鲜培养基,开始降低生物反应器内的体积。  

步骤D:工艺结束 
HPH补料分批可以在与传统补料分批相同的时间内结束,或延长生产运行,以进一步提高产量。  

注意:在本示例中,培养基置换在第10天开始,但也可根据工艺情况进行调节。

高产量收获技术

交替式切向流(ATF)过滤

ATF是一种屡获嘉奖的技术,其可去除耗竭的培养基,同时将细胞截留在培养体系中。应用时,将 XCell ATF® 设备连接到生物反应器,ATF 可最大限度地降低细胞剪切,并保持细胞与生物反应器内容物的恒定平衡,从而获得更快的细胞生长,达到更高的密度和产量。目前,XCell ATF® 设备,包括一次性使用或重复使用形式,已经成为单抗和重组蛋白生产的领先灌流设备。

  • XCell ATF®  一次性使用设备可实现100%细胞截留,同时使搭建时间加快80%,且无需高压灭菌
  • XCell ATF® 不锈钢 设备可实现100%细胞截留,高细胞密度和产物产量