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常见问题 | LONG EGF

常见问题 | long® EGF

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LONG® EGF 是人表皮生长因子(EGF)的重组类似物,用于经监管批准的基于细胞的治疗方案。其被开发作为添加物,用于治疗性细胞培养应用,是天然EGF或重组人EGF(hEGF)的等效替代物。它包含人EGF氨基酸序列和一个含有53个氨基酸的N端延伸肽。

LONG® EGF 可应用于MSC、iPS、上皮细胞、成纤维细胞、HEK293、BHK-21和MDCK细胞系。在特定细胞系中,LONG® EGF 可能与 LONG®R3 IGF-I呈现协同效应。

是的,LONG® EGF的生产遵循 cGMP 标准。生产工厂定期接受欧洲和美国合同制造商以及生物制药公司的审计。

LONG® EGF 符合法规要求,目前已被用于经监管批准且已上市的细胞治疗产品的生产。

了解REPLIGEN生产的更多信息

没有,LONG® EGF 是一种在 E. coli中生产的cGMP级重组蛋白,其专门生产用于哺乳动物细胞培养,生产工艺无动物源性成分。

推荐的浓度范围是10 - 50 μg/ l。最高不应超过100 μg/l,通常较低的浓度比较高的浓度效果更好。作为起始点,我们建议开发 50 μg/l含量的培养基。

我们不建议将冻干的制剂溶解在培养基中。

建议浓度为1 mg/ml或以上。

与其它肽一样,在没有其它蛋白质成分存在时,LONG® EGF 会粘附到管道和过滤器上。我们建议在使用前,使用低蛋白质结合过滤器,对加入了添加物的培养基进行除菌过滤。

  1. 在受控的环境中,如层流柜,使用无菌技术,进行所有的操作。
  2. 打开小瓶时要小心,以使内容物与环境压力达到平衡。
  3. 可以通过塞子插入充气注射器,以在打开之前,平衡压力。
  4. 复溶时,推荐制备成浓度为 1 mg/ml的10 mM HCl溶液。
  5. 无论瓶子大小,都必须原位溶解整个瓶子。不要根据重量或重量分析法估计蛋白质含量,因为在冻干过程中残留的水分的原因,这将低估实际蛋白质含量。
  6. 使用 10 mM HCl 进一步稀释至0.1 mg/ml,以制备工作原液。请勿使用磷酸盐缓冲液(PBS)或含磷酸盐的缓冲液稀释至工作原液,因为这会导致蛋白质从溶液中沉淀出来。
  7. 可以在PBS或其它缓冲溶液(包括细胞培养基)中进行之后的稀释。
  8. 如果需要过滤,建议使用1 mg/ml或0.1 mg/ml 工作储液和低蛋白质结合滤膜,以避免过滤过程中的任何非特异性蛋白质结合。