AAV 亲和填料

AVIPure^® - AAV 亲和填料可实现腺相关病毒(AAV) 2、8 和 9 载体的捕获步骤纯化，并可在线碱清洗再生，以提高工艺经济性。50 µm 交联琼脂糖基球可确保与标准生物工艺层析柱和流速兼容。

性能更佳且可再生的 AAV 亲和填料

AVIPure^® - AAV2、8 和 9 亲和填料可达到或超过以其它平台开发的填料的性能指标，并具有稳健的碱稳定性。亲和填料提供了简化下游工艺的能力。耐受NaOH清洗的亲和填料既可以简化工艺，又可以显著提高整体工艺经济性。在使用 0.5 M NaOH（30 min）在线清洗步骤进行20次循环后，所有三种 AAV 亲和填料均显示保留超过 95% 的动态结合载量(DBC)、宿主细胞蛋白 (HCP) 清除率以及残留 DNA 清除率。

可用 0.5 M NaOH 在线清洗达20 个循环以上
实现高DBC
- 保留时间为1 min时，>1 x 10¹⁴ vp/mL DBC
- 保留时间为4 min时，>1 x 10¹⁵ vp/mL DBC
使用苯甲醇储存缓冲液
可在3 bar条件下，以>300 cm/hr 高流速运行（2.6 x 20 cm柱以 4 bar 压力装柱）

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以 2 min 保留时间结合并清除更多 HCP 和DNA

使用AVIPure^® - AAV2 填料进行AAV细胞培养进液（未浓缩）的结合、漂洗和洗脱。2 min保留时间可消除现有的预浓缩步骤。产物以50 mM 甘氨酸、150 mM NaCl、 0.01% P188、 pH 3洗脱，收率83%。

AVIPure^® - AAV2 和其它品牌AAV 亲和填料在相同条件（2 min保留时间）下运行，洗脱产物进行 SDS-PAGE纯度、HCP 和残留DNA 分析。AVIPure^® - AAV2 可获得残留HCP低7倍、残留DNA低1.5倍且杂质蛋白质更低的纯化产物。

填料	残留 HCP	残留 DNA
AVIPure^® - AAV2 填料	4400 ppm	2400 ppm
供应商 A	33000 ppm	4000 ppm

泳道	样品
1	AVIPure^® 洗脱液
2	AVIPure^® NaOH CIP
3	竞品洗脱液
4	竞品 NaOH CIP

NaOH CIP 再生后可保持性能

使用单根层析柱和基于 NaOH 的 CIP（浓缩HEK293 CCF 裂解液，0.5 M NaOH 30 min CIP）进行结合、漂洗、洗脱和 CIP的20个循环的重叠曲线。0.5M NaOH 暴露时间总计 10 小时。

使用浓缩的 HEK293 澄清细胞培养液重复结合、漂洗、洗脱和 CIP 循环 20 次。CIP 包括使用 0.5 M NaOH 的 30 min保持步骤。在20 个循环中，平均收率为 95%。

使用浓缩的 HEK293 澄清细胞培养液重复结合、漂洗、洗脱和 CIP 循环 20 次。CIP 包括使用 0.5 M NaOH 的 30 min保持步骤。在20个循环中，残留 DNA 清除率平均为 5 倍。

使用浓缩的 HEK293 澄清细胞培养液重复结合、漂洗、洗脱和 CIP 循环 20 次。CIP 包括使用 0.5 M NaOH 的 30 min保持步骤。在20 个循环中，收率平均为95%，HCP 清除率平均为 3.4 logs。

填料特性

类别	Description
基质	交联琼脂糖，球形
粒径 (d _{50 V} )	~ 50 µm
配基	AAV2 和 AAV8: 耐碱重组蛋白（无动物源性） AAV9: 耐碱多肽（合成）
偶联化学	AAV2: 硫醇 AAV8 和 AAV9: 氨基甲酸酯
结合化学	实现高DBC 保留时间为1 min时，>1 x 10¹⁴ vp/mL DBC 保留时间为4 min时，>1 x 10¹⁵ vp/mL DBC
缓冲液兼容性	对所有常用的水性缓冲液稳定，包括 8 M 尿素、6 M 盐酸胍、乙二醇和去污剂
溶剂兼容性	水、乙醇 (0–20% v/v)、乙腈、1–2 M 乙酸、其它常见有机溶剂
pH 稳定性	1-13
在线清洗稳定性	0.1-0.5 M NaOH
压力/流速 ^a	3 bar @ >300 cm/hc
最高压力 (ΔP)a	40 psi
温度稳定性	2–40 °C
发货状态	2 % 苯甲醇
储存	2 – 8 °C， 2 % 苯甲醇；不要冻结
^a 2.6 x 20 cm层析柱，以4 bar压力装柱