AVIPure® - AAV2、8 和 9 亲和填料可达到或超过以其它平台开发的填料的性能指标,并具有稳健的碱稳定性。亲和填料提供了简化下游工艺的能力。耐受NaOH清洗的亲和填料既可以简化工艺,又可以显著提高整体工艺经济性。在使用 0.5 M NaOH(30 min)在线清洗步骤进行20次循环后,所有三种 AAV 亲和填料均显示保留超过 95% 的动态结合载量(DBC)、宿主细胞蛋白 (HCP) 清除率以及残留 DNA 清除率。
使用AVIPure® - AAV2 填料进行AAV细胞培养进液(未浓缩)的结合、漂洗和洗脱。2 min保留时间可消除现有的预浓缩步骤。产物以50 mM 甘氨酸、150 mM NaCl、 0.01% P188、 pH 3洗脱,收率83%。
AVIPure® - AAV2 和其它品牌AAV 亲和填料在相同条件(2 min保留时间)下运行,洗脱产物进行 SDS-PAGE纯度、HCP 和残留DNA 分析。AVIPure® - AAV2 可获得残留HCP低7倍、残留DNA低1.5倍且杂质蛋白质更低的纯化产物。
填料 |
残留 HCP |
残留 DNA |
AVIPure® - AAV2 填料 | 4400 ppm | 2400 ppm |
供应商 A | 33000 ppm | 4000 ppm |
泳道 |
样品 |
1 | AVIPure® 洗脱液 |
2 | AVIPure® NaOH CIP |
3 | 竞品洗脱液 |
4 | 竞品 NaOH CIP |
使用单根层析柱和基于 NaOH 的 CIP(浓缩HEK293 CCF 裂解液,0.5 M NaOH 30 min CIP)进行结合、漂洗、洗脱和 CIP的20个循环的重叠曲线。0.5M NaOH 暴露时间总计 10 小时。
使用浓缩的 HEK293 澄清细胞培养液重复结合、漂洗、洗脱和 CIP 循环 20 次。CIP 包括使用 0.5 M NaOH 的 30 min保持步骤。在20 个循环中,平均收率为 95%。
使用浓缩的 HEK293 澄清细胞培养液重复结合、漂洗、洗脱和 CIP 循环 20 次。CIP 包括使用 0.5 M NaOH 的 30 min保持步骤。在20个循环中,残留 DNA 清除率平均为 5 倍。
使用浓缩的 HEK293 澄清细胞培养液重复结合、漂洗、洗脱和 CIP 循环 20 次。CIP 包括使用 0.5 M NaOH 的 30 min保持步骤。在20 个循环中,收率平均为95%,HCP 清除率平均为 3.4 logs。
类别 |
Description |
---|---|
基质 | 交联琼脂糖,球形 |
粒径 (d 50 V ) | ~ 50 µm |
配基 |
AAV2 和 AAV8: 耐碱重组蛋白(无动物源性) AAV9: 耐碱多肽(合成) |
偶联化学 | AAV2: 硫醇 AAV8 和 AAV9: 氨基甲酸酯 |
结合化学 |
实现高DBC 保留时间为1 min时,>1 x 1014 vp/mL DBC 保留时间为4 min时,>1 x 1015 vp/mL DBC |
缓冲液兼容性 | 对所有常用的水性缓冲液稳定,包括 8 M 尿素、6 M 盐酸胍、乙二醇和去污剂 |
溶剂兼容性 | 水、乙醇 (0–20% v/v)、乙腈、1–2 M 乙酸、其它常见有机溶剂 |
pH 稳定性 | 1-13 |
在线清洗稳定性 | 0.1-0.5 M NaOH |
压力/流速 a | 3 bar @ >300 cm/hc |
最高压力 (ΔP)a | 40 psi |
温度稳定性 | 2–40 °C |
发货状态 | 2 % 苯甲醇 |
储存 | 2 – 8 °C, 2 % 苯甲醇;不要冻结 |
a 2.6 x 20 cm层析柱,以4 bar压力装柱 |
AAV亲和填料可用于预装、预质量确认的OPUS® 层析柱,以快速部署于 GMP应用,同时,也提供散装形式填料。
使用预装、预质量确认的OPUS®层析柱,可使您在数周内从开发进入生产规模。
关于 OPUS ®层析柱
Repligen为生物制药行业开发和制造产品。我们专注于及时交付高质量、一致且稳健的产品,以确保我们客户的业务连续性。
Repligen 子公司Avitide是一家通过 ISO 9001:2015 认证的填料制造商和定制亲和纯化填料供应商,总部位于美国新罕布什尔州Lebanon。公司已在美国和欧洲建立了生产基地,具有多个填料仓储站点、多个经认证的填料生产工厂以及多个配基生产工厂。